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武汉汉协泰科技有限公司
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供应global DMSO Blastocyst 玻璃化冷冻复温套装

发布时间:2010/12/27 11:26:00 浏览次数:1445
基本信息
产品类型: 其它
质量标准: 通过美国和欧洲相关标准
零售价格: 电议
供货价格:

详情介绍

global® DMSO Blastocyst 玻璃化冷冻复温套装


·1瓶1ml解冻液1,包含蔗糖和10mg/ml的HSA,使用 global® w/HEPES缓冲液。

·1瓶1ml解冻液2,包含蔗糖和10mg/ml的HSA,使用 global® w/HEPES缓冲液。

·1瓶1ml解冻液3,包含10mg/ml的HSA,使用 global® w/HEPES缓冲液。

·4个SunIVF embryo GPS® 操作皿,产品经过无菌、内毒素和MEA检测。

使用说明

1.再水合过程应该在20-27°C下进行。

2.在培养设备中孵化时尽量减少标本见光。

3.在使用 global® DMSO Blastocyst玻璃化冷冻复温套装(解冻液1, 解冻液2 and 解冻液3)之前,将其升温至20-27°C。

4.参阅玻璃化冷冻载体生产商关于所使用载体的使用说明。

5.用液氮填充液氮贮存器到足够的深度,深度必须能完全淹没装有载体的冻存管(杯),将液氮贮存器放置于包含有要解冻的玻璃化样品的液氮罐附近。

6.将载体从Cryocane和冻存管(杯)中取出并且快速转移到装有液氮的液氮贮存器中,保持载体始终浸在液氮中。

7.把液氮贮存器放置于显微镜附近,以方便快速操作。

8.在SunIVF embryo GPS® 操作皿上标记**必要的信息。

9.使用前,把每瓶解冻液1、解冻液2、解冻液3 轻轻正反摇动几次将其摇匀。

10.在无菌条件下,转移20 μl 解冻液1到SunIVF embryo GPS®(W1a)中,见图2。

11.转移两滴20 μl 解冻液2到SunIVF embryo GPS®(W2a & W2b)中,见图2。


复温和再水合

12.用镊子找到液氮存储器内冻存管(杯)中的载体,此时只有处理一个载体。

13.小心载体从冻存管(杯)中取出,保持装有胚泡的部分在液氮液面以下。
14.遵照载体的使用说明进行复温和打开载体,然后立即转移载体中的内容物(约1μl)到embryo GPS® 操作皿中,见图2。防止转移内容物时形成泡泡。

15.从W1a中取大约1μl 溶液并转移到包含胚泡的液滴旁边,见图2(W1b)。

16.使用玻璃化冷冻用具融合两个液滴,让两者逐渐混合一分钟。

17.从W1a中取少量溶液到移液管中,然后使用它从W1b拾起胚泡并转移到W1a的底部。

18.在W1a中握持胚泡1分钟。胚泡将缩小并浮在液滴的顶部。

19.提示:在下面的步骤中,每次转移胚胎以后,进行下一操作之前,都要排出**移液管中的液体并从下一滴溶液中吸取一些溶液。在转移过程中要避免产生泡泡。

20.将胚泡从W1a中转移到W2a底部。

21.将胚泡在W2a中握持2分钟。

22.将胚泡从W2a中转移到W2b底部。

23.将胚泡在W2b中握持2分钟。

24.提示:胚泡在W2a和W2b中仍然保持缩小的状态。

25.在W2b的握持时间内,转移三个20μl的解冻液3到embryo GPS® 操作皿中,见图2(W3a, W3b & W3c)。

26.将胚泡从W2b中转移到W3a底部。

27.将胚泡在W3a中握持3分钟。

28.将胚泡从W3a中转移到W3b顶部。

29.将胚泡在W3b中握持3分钟。

30.将胚泡从W3b中转移到W3c顶部。

31.将胚泡在W3c中握持3分钟。

32.后,将胚泡转移到一个已经装有预先平衡过的合适的培养基的embryo GPS® 操作皿中,并且在CO2培养箱37°C培养3~4小时,以便在胚胎移植前做进一步的操作。

如果需要解冻更多的胚泡,重复上述8~22步骤,需要使用新的GPS® 胚胎操作皿以及新鲜的平衡液和玻璃化冷冻液。

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