基因工程用于DNA鉴定的杂交技术
2012/7/19  阅读数：

    据www.qgyyzs.net小编了解，如果将互补的特定核苷酸序列的单链dna或者rna混合在一起，那么其相应的同源片段就会退火形成双链结构。退火的核酸来自于不同的生物有机体，所形成的双链核酸就称为杂种核酸分子。能够杂交形成的杂种分子不同来源的dna分子，其亲缘关系较为密切，反之则亲缘关系较远。所以就可以用来检验特定生物有机体的亲缘关系了，而dna/rna间杂交分子的形成能力被用来揭示核酸片段中某一个特定基因的位置。

    在大多数的核酸杂交反应中，经过凝胶电泳，分离到的dna或者rna分子都是杂交之后经毛细管作用或者电导作用，原封不动吸印转移到滤膜上，又称为dna印记杂交。常用到的滤膜有尼龙滤膜、二乙胺基乙基纤维素滤膜、硝酸纤维素滤膜等。

    将核酸样品转移到固体支持物滤膜上，即核酸印迹转移，主要有电泳凝胶核酸印迹法、斑点和狭线印迹法、菌落和噬菌斑印迹法。将具有核酸印迹的滤膜同带有放射性标记或者其他标记的dna或rna探针进行杂交，称为印记杂交。杂交的具体步骤是将含有经电泳分离的不同相对分子质量的dna片段的琼脂糖凝胶，通过碱变性等预处理平铺在已用电泳缓冲液饱和的滤纸上，凝胶之上覆盖一层滤膜，加上一叠干滤纸，最后加压一重物。干滤纸对缓冲液的吸引导致凝胶中单链dna的转移。被吸附的dna在烘烤条件下或者紫外线交联法永久固定，使用探针处理即可。

编辑：山西:小张