DNA分析方法
2012/7/20  阅读数：

    据www.qgyyzs.net小编了解，dna的序列分析，在生物医药的研发，尤其是在生物药物上有着极其重要的作用，因为这涉及到基因工程生产生物药物。比较常见的有三种，即sanger的双脱氧链终止法、maxam-gilbert化学修饰法和dna序列分析自动化。

    sanger的双脱氧链终止法是英国剑桥大学分子生物学实验室的f·sanger在一九七七年发明的。该方法要求使用一种单链dna模板和一种适当的dna引物，又称为引物合成法或者酶催化引物合成法。dna聚合酶能够将单链dna作为模板，合成精准的dna互补链。该酶能够用2’，3’-双脱氧核苷三磷酸作为底物，将其聚合到新生的寡核苷酸链的3’-末端，从而终止了dna链的延伸反应。在dna测序反应中，加入模板dna，引物，dna聚合酶，datp、dgtp、dttp、dctp和一种ddntp。四支试管分别加入ddatp、ddgtp、ddttp和ddctp中的一种。在dna合成过程中，常使用klenow大片段催化合成单链dna模板序列的互补链。反应完成后，点样到同一个变性凝胶进行电泳，通过放射自显影读出dna的核苷酸序列。maxam-gilbert化学修饰法的基本原理是用化学试剂处理具有末端放射性标记的dna片段，造成碱基的特异性切割产生一组具有不同长度的dna链降解产物，经凝胶电泳和放射自显影后，可以直接读出dna片段的核苷酸序列。

    dna序列分析自动化避免了前两种使用放射性同位素对研究人员造成的伤害，虽然前两方法是最有效的。

编辑：山西:小张