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地塞米松对蛋清诱发大鼠足跖肿的影响实验

山东朱氏药业集团有限公司2022/10/8 0:00:06

实验方法原理

异体蛋白进入机体后可在短时间内引起组织的急性炎症反应，发生炎症的部位明显肿胀、体积增大。肾上腺皮质激素可通过多种方式明显抑制**致炎因素引起的炎症，从而改善红、肿、热、痛等症状。本实验通过测定大鼠踝关节肿胀程度，观察炎症的发生及地塞米松的抗炎作用。

实验材料 大鼠

试剂、试剂盒 地塞米松磷酸钠生理盐水鸡蛋清吲哚美辛混悬液

仪器、耗材 容积测量装置注射器天秤软尺线棉手套记号笔 大鼠固定器鼠笼灌胃针烧杯

实验步骤

一、周长或测量法







⒈  取禁食过夜、体重相近的雄性大鼠3只，称重并分别以不同记号标记甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理盐水5 ml灌胃，以**大鼠体内水分相同。







⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸钠注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃给予1％吲哚美辛混悬液10 mg/Kg（1％混悬溶液1 ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理盐水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝关节处用沾有油漆的丝线作一圆周形标记，再用丝线绕标记测量周长或厚度千分尺测量厚度两次。30 分钟后，在大鼠左或右后足掌腱膜下向踝关节周围用5 号针头注入新鲜鸡蛋清0.1ml，以后每隔10 分钟测量大鼠左或右后踝周长或厚度，连测6次，用致肿前后左后踝周长厚度之差，作为踝关节肿胀程度。







二、容积法







⒈  取禁食过夜、体重相近的雄性大鼠3只，称重并分别以不同记号标记甲鼠、乙鼠、丙鼠，每只大鼠生理盐水5 ml灌胃，以**大鼠体内水分相同。







⒉  甲鼠腹腔注射0.5％地塞米松磷酸钠注射液5 mg/Kg（0.5％溶液1 ml/Kg）、乙鼠灌胃给予1％吲哚美辛混悬液10 mg/Kg（1％混悬溶液1ml/Kg）、丙鼠腹腔注射生理盐水1 ml/Kg。于左或右后肢的踝关节处用沾有油漆的丝线作一圆周形标记，以排水法测量大鼠左后足之正常容积（以ml 表示）。30 分钟后，在大鼠左后足掌腱膜下向踝关节周围注入新鲜鸡蛋清0.1 ml，以后每隔10 分钟测量大鼠左后踝容积，连测6 次，用致肿前后左后踝容积之差，作为踝关节肿胀程度。




⒊  排水法操作步骤：







⑴转动三通活塞D，使 A与B相通。将水推到吸管“O”处，接着关闭B，使A 与C相通。







⑵注射器的水推完，使玻管C 内液面与其刻度圈平齐（玻管C 内水量多少可用滴管直接调节）。







⑶每次测量位置相同，可用记号笔或黑漆在实验大鼠左后踝关节划一标记，然后将左后肢拉直置入玻管C内，抽动注射器针芯，使左后肢标记处与玻管C上的刻度相平。待玻管C内液面与其刻度相平时，立即关闭C，使A与B相通，随即取出大鼠后肢。







⑷将注射器内剩余液体**推入吸管B，记录水柱高度。此时吸管B 内显示的水柱高度即代表所测踝关节肿胀程度的容积。







三、结果




将实验室各组实验结果算出平均值，以横坐标表示时间（分），纵坐标表示关节肿胀周长或容积，绘制成坐标图。







注意事项

⒈  周长或厚度测量法：测量周长的软皮尺不能有弹性，刻度以0.2 mm左右为宜，测量部位尽量少移动，每次测量的宽紧度必须一致。测量动作要熟练，要由专人负责，尽量减少误差。注射致炎剂时，实验者应将动物后肢拉直，先自跖中部皮下向上注入一部分，然后掉转针头向下注完。







⒉  容积法：在每一次测量之前，都要调节C和B的零点，若因大鼠肢体带走部分水分，则必须把水补充到玻管C的刻度处，再按上述顺序测量。