3502 甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检查法

       本法系以酶联免疫法测定供试品中的甲型肝炎病毒抗原含量,并以参比疫苗为标准,计算供试品的相对效力。
        参比疫苗及供试品溶液制备  将参比疫苗与供试品采用适宜方法进行解离后,用相应供试品稀释液进行倍比稀释,取1:2、1:4、1:8、1:16、1:32或其他适宜5个稀释度进行测定。
        测定法  用纯化的甲肝病毒抗体包被酶标板,每孔100μl, 2~8℃放置过夜,然后洗板、拍干。用10%牛血清PBS溶液进行封闭,每孔200μl,37℃孵育1小时。
        取已包被的酶标板,加入各稀释浓度的参比疫苗和供试品,每个稀释度加3孔,每孔100μl,37℃孵育1小时或2~8℃过夜,洗板后加酶结合物,每孔加100μl, 37℃孵育1小时。
         洗板后加显色液,每孔100μl,37℃孵育10~15分钟,加终止剂50μl,读取吸光度(A)。
        结果计算  将测出的参比疫苗及供试品的A均值乘以1000后记录于下表
        

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