一、T细胞亚群检测：
（一）T细胞花结形成试验：细胞表面有绵羊红细胞（SRBC）的受体，可与SRBC形成花环样细胞，称为红细胞玫瑰花环形成或E玫瑰花环形成。
1、正常参考值：EtRFC64.4±6.7%；EaRFC23.6±3.5%；EsRFC3.3±2.6%。
2、临床意义：
（1）E花环值减低： ①见于免疫缺陷病（如Digeorge综合征，Wiskott－Aldrich综合征，Nezelof综合征）以及原发性细胞和体液免疫同时缺乏性疾病。上述这些病当用胸腺素等治疗后，EaRFC可明显增高。②某些恶性肿瘤、麻疹、麻疹脑炎、腮腺炎、带状疱疹、系统性红斑狼疮、皮肌炎、瘤型麻风以及应用免疫抑制剂时，亦见E花环值降低。有人认为某些恶性肿瘤EaRFC可早于病情恶化的临床表现，而EtRFT仍可正常。
（2）E花环值增高：见于甲状腺功能亢进、甲状腺炎（此两症病情缓解时可恢复正常）、重症肌无力、慢性活动性或迁延性肝炎、慢性淋巴细胞白血病以及移植排斥时。
（二）细胞转化试验：T淋巴细胞与有丝分裂原在体外共同培养时，受到后者的刺激可发生形态学和生物化学的变化，部分小淋巴细胞转化为不成熟的母细胞，并进行有丝分裂，这种方法称为淋巴细胞转化试验。又称T细胞返幼试验。T细胞在体外培养时，受到有丝分裂原如植物血凝素（PHA）刺激后，可转化体积大的母细胞。
1、正常参考值：60.l±7.6%
2、临床意义：T淋巴细胞在体外经植物血凝素激活后，可转化为淋巴母细胞，根据淋巴细胞的转化情况，可反应机体的细胞免疫水平。淋巴细胞转化率降低表示细胞免疫水平低下，可见于运动失调性毛细血管扩张症、恶性肿瘤、何杰金病、淋巴瘤、淋巴肉芽肿、重症真菌感染、重症结核、瘤型麻风等。此外，本试验还可帮助观察疾病的疗效和预后，经治疗后转化率由低值转变为正常者表示预后良好，反之则预后不良。
（三）T细胞分化抗原测定：T细胞膜表面有100多种特异性抗原，现已制备了多种单克隆抗体，WHO（1986）统称为白细胞分化抗原（CD）。例如CD3代表总T细胞，CD4代表T辅助细胞（TH），CD8代表T细胞毒性细胞（TC）等。应用这些细胞的单克隆抗体与T细胞表面抗原结合后，再与荧光标记二抗（兔或羊抗鼠IgG）反应，在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。
1、正常参考值：免疫荧光法（IFA）：CD3为63.1%±10.8%；CD4（TH）为42.8%±9.5%；CD8（TS）为19.6%±5.9%；CD4/ CD8（TH/TS）为（2.2±0.7）/1。流式细胞术：CD3为61%～85%；CD4为28%～58%；CD8为19%～48%；CD4/ CD8为0.9～2.0/1。
2、临床意义:
①CD3降低：见于自身免疫性疾病，如SLE、类风湿关节炎等。
②CD4降低：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者。
③CD8减低：见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病。
④CD4/ CD8比值增高：见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒性感染、变态反应等；CD4/ CD8比值减低：见于艾滋病（常<0.5）。
⑤监测器官移植排斥反应时CD4/ CD8比值增高预示可能发生排斥反应。
⑥CD3、CD4、CD8较高且有CD1、CD2、CD5、CD7增高则可能为T细胞型急性淋巴细胞白血病。
二、B细胞分化抗原检测：B细胞具有多种特异性抗原和受体，据此建立了相应的检测方法，一般用以研究B细胞各分化发育阶段的特性，也可藉以鉴定和计数各阶段B细胞在人外周血和淋巴样组织的分布以及疾病时的变化动态，为临床提供诊治相关疾病的有用信息。B细胞表面有CD， CD19、CD20、CD21、CD22和CD29等分化抗原，其中有些系全部B细胞所共有，而有些仅活化B细胞所特有，据此可用相应的CD系列单克隆抗体，通过间接荧光免疫法、酶免疫组化或ABC法加以检测。健康成年人外周血CD20阳性细胞约占淋巴细胞总数的8％～12％。
1、正常参考值：CD19＋11.74±3.37％。
2、临床意义：
（1）升 高：见于急性淋巴细胞白血病（B细胞型，且有Smlg、HLA-D表达），慢性淋巴细胞白血病和Burkitt淋巴瘤等。
（2）降 低：见于无丙种球蛋白血症，使用化疗或免疫抑制剂后。
三、自然杀伤细胞免疫检测：
（一）自然杀伤细胞活性检测：自然杀伤细胞是NK细胞的简称。它不同于T细胞，也不同于K细胞，对靶细胞杀伤时既不需特异性抗体参加，也不需抗原预先致敏。主要存在于外周血、脾脏和骨髓中，淋巴结中含量极少，胸腺中没有发现。现一般认为，自然杀伤细胞来源于骨髓。其免疫活性比K细胞、T细胞要小得多，但T细胞获得杀伤能力大约需10天左右的致敏时间，K细胞的杀伤作用又必须有IgG的特异性抗体的参与，而自然杀伤细胞却能立即发挥非特异性杀伤靶细胞的作用，尤其是对多种肿瘤细胞有迅速杀伤和溶解作用。因此，自然杀伤细胞对癌症的监视作用已越来越受到重视。
1、正常参考值：自然杀伤细胞占周围淋巴细胞总数：3%～20% 51Cr释放法：自然释放率：＜10%～15% 自然杀伤率：47.6%～76.8% 51Cr利用率：6.5%～47.8% LDH:39.49±12.01 。
2、临床意义：
(1)自然杀伤细胞总数正常但活力下降：肿瘤、慢性多发性硬化症、感染性疾病。
(2)自然杀伤细胞总数和活力均下降：急性多发性硬化症、系统性红斑狼疮。
（二）抗体依赖性细胞介导的细胞毒（ADCG）测定：ADCG特异性由抗体决定，这类细胞表面有抗体Fc受体，当与相应的抗体结合后，抗体被激活，ADCG细胞得以与抗体的Fc受体结合，引起靶细胞的杀伤与破坏。
1、正常参考值：51Cr释放法：51Cr释放率<10％为阴性，10％～20％为可疑阳性，≥20％为阳性；溶血空斑法<5.6％为阴性。
2、临床意义：
（1）增 高：见于自身免疫性疾病，如自身免疫性血小板减少症、自身免疫性溶血性贫血、免疫性粒细胞缺乏症，甲状腺功能亢进，移植排斥反应等。
（2）降 低：见于恶性肿瘤、免疫缺陷病、慢性肝炎、肾功能衰竭等。
四、细胞因子检测：
（一）白介素－2（IL-2）活性及其受体测定：它是由多细胞来源（主要由活化T细胞产生），又具有多向性作用的细胞因子（主要促进淋巴细胞生长、增殖、分化）；对机体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用，能刺激已被特异性抗原或致丝裂因数启动的T细胞增殖；能活化T细胞，促进细胞因子产生；刺激NK细胞增殖，增强NK杀伤活性及产生细胞因子，诱导LAK细胞产生；促进B细胞增殖和分泌抗体；激活巨噬细胞。检测体内IL-2可判断机体免疫功能。
1、正常参考值：5～15kU／L。
2、临床意义：
（1）增 高：见于自身免疫性疾病（SLE、类风湿关节炎等）、再障、多发性骨髓瘤、排斥反应等。
（2）降 低：鉴于免疫缺陷病（艾滋病、联合免疫缺陷病等）恶性肿瘤、I型糖尿病、某些病毒感染等。
（二）肿瘤坏死因子（TNF）测定：TNF主要由巨噬细胞和单核细胞产生。已发现TNF可对众多的组织器官产生生物效应，它是体内细胞因子网络中重要的多功能物质。TNF具有多种生物效应，主要是介导抗肿瘤及调节机体的免疫功能，也是炎症反应介质之一，参与炎症病变的多方面病理变化。测定血清或其他体液中TNF浓度，是基础医学和临床多种疾病的诊疗很有价值的指标。
1、正常参考值：4.3＋－2.8ug／L。
2、临床意义：
（1）肿瘤：许多肿瘤细胞可产生TNF，因此在多种肿瘤时机体内TNF表达明显升高。TNF又可通过细胞毒作用，杀死肿瘤细胞或抑制某些肿瘤细胞增殖。
（2）风湿性关节炎患者的滑膜中有大量TNF。
（3）在脓毒败血症、感染性肺炎等严重炎性疾病时血清中TNF含量明显增高。许多寄生虫病患者中TNF也显著改变。艾滋病患者体液中TNF也高于正常人。疟疾抗原、病毒和细菌均可诱导TNF产生，TNF又反过来具有抗病毒、抗细菌、抗疟疾作用。
（4）TNF与移植排斥反应密切相关，在患者的血清或尿液中TNF的表达与排斥反应程度呈正相关。
（三）干扰素（IFN）测定：IFN分为两型，Ⅰ型干扰索包括α-IFN和β-IFN是由白细胞和成纤维细胞产生，Ⅱ型干扰素，又称γ-IFN或免疫干扰素是由有丝分裂原刺激T淋巴细胞产生。干扰素是一种高效的抗病毒生物活性物质，又是一种具有广泛免疫调节作用的淋巴因子。干扰素检测方法较多，如空斑减少法、病毒定量法、放免测定法与细胞病变抑制法等。
1、正常参考值：1～4kU／L（ELISA法）。
2、临床意义：
（1）增 高：见于SLE、非活动性类风湿关节炎、恶性肿瘤早期、急性病毒感染、再障。
（2）减 低：见于乙肝及携带者、哮喘、活动性类风湿关节炎等。
第二节 细胞免疫检测