一、甲型肝炎病毒标记物检测：抗甲型肝炎病毒IgM抗体（酶联免疫夹心法）阴性 免疫粘附血球凝集试验(IAHA) 阴性 早期单份血清抗HAV－IgM抗体效价显著升高，或双份血清HAV抗体效价递增者即可确诊。
（一）甲肝病毒抗原测定：甲型肝炎病毒抗原是一种能够引发甲型肝炎病毒抗体产生的物质，检测出甲型肝炎病毒抗原可证实甲型肝炎病毒在体内的存在。
1、正常参考值：阴性。
2、临床意义：阳性见于甲型肝炎潜伏期和发病后几天之内。此时，血及粪便均有传染性。粪便为主要传染源，其甲型肝炎病毒的检出可始于发病前1-2周，发病时达高峰，丙氨酸氨基转移酶(ALT)达高峰前排毒中止。一般50%的急性甲型肝炎病人住院后1周可于粪便中检出甲型肝炎病毒。甲型肝炎病毒流行病学调查意义大于临床。特别在幼托机构发现甲型肝炎后，收集同一人群粪便送检能及早发现潜伏期及亚临床感染的个体从而尽早隔离，切断传染源，对控制甲型肝炎流行有重要意义。甲型肝炎病毒及其RNA检测可用于食品检疫、追踪传染源，如对流行区河海口水源及贝壳类食品检疫可及早确定传染源。
（二）甲肝病毒抗体检测：抗体检测是用于判断甲肝病毒感染的主要方法之一。
1、正常参考值：ELISA法抗HAV-IgM和抗HAV-IgA均为阴性；抗HAV-IgG阴性。
2、临床意义：
（1）抗-HAV IgM：发病后1周左右即可在血清中测出。其出现与临床症状及化验指标异常的时间一致，第2周达高峰。一般持续8周，少数患者可达6个月以上。但个别病人病初阴性，2-3周后方检出阳性。所以临床疑诊甲型肝炎，而抗-HAV IgM阴性，应重复1-2次，以免漏诊。当前，抗-HAVIgM是早期诊断甲型肝炎的特异性较高的指标，且有简便，快速的优点。
（2）抗HAV-IgA：IgA型抗体又称分泌型抗体，主要存在于泪眼，唾液，尿液，胃液，乳汁，鼻腔分泌物中，胃液中的IgA可排入粪便中，在甲型肝炎患者粪便提取液中可测得抗HAV-IgA。可作为甲型肝炎的辅助诊断。
（3）抗HAV-IgG:是既往感染的指标，因其是保护性抗体，可保护人体再次感染故可作为流行病学调查，了解易感人群。
（三）HAV-RNA检测：粪便中HAV的检测和血清甲肝核糖核酸（HAVRNA）亦有诊断价值，但需要一定的设备和技术，不作为常规检查项目。
1、正常参考值：反转录聚合没反应（RT-PCR）法阴性。
2、临床意义：阳性对诊断特别是早期诊断具有特异性。可检测粪便水源排毒情况，有利于及时监测与预防工作。
二、乙型肝炎病毒标志物检测:
（一）乙肝六项检测：乙肝六项是由大家常说的“两对半”（乙肝五项）加前S1抗原组成的。包括HBsAg、抗－HBs、HBeAg、抗－HBe、抗－HBc＋HBcAg，乙肝六项检查主要检测乙肝病毒对人体的感染，病程转归以及对乙肝病毒的免疫状态。
1、正常参考值：阴性。
2、临床意义：
（二）乙肝病毒表面抗原蛋白前S1和前S1抗体检测：乙肝病毒DNA有不同的基因区域，其中S区担负着编码病毒衣壳蛋白的任务，也就是常说的表面抗原。乙肝病毒S基因由S基因、前S1基因、前S2基因组成，分别编码S蛋白(乙肝病毒表面抗原)，前S1蛋白(前S1抗原)、前S2蛋白(前S2蛋白)。前S1及前S2抗原可刺激机体产生相应的前S1抗体和前S2抗体。
1、正常参考值：ELISA法或RIA法：Pre-S1为阴性；抗Pre-S1阴性。
2、临床意义：前S1抗原可识别肝细胞表面特异性的病毒受体，是非常重要的传染性指标。同时血清前S1抗原的存在于病毒复制的关系密切，作为病毒复制指标较HBeAg敏感，可以反映HBeAg阴性乙肝患者体内病毒活动状况，避免由于HBeAg阴性造成的误诊和漏诊，对二对半检测其重要的补充作用。前S1抗原阴转越早，前S1抗体阳转越早，患者病程越短，预后越好。
（三）乙肝病毒表面抗原蛋白前S2和前S2抗体检测：乙肝病毒表面抗原蛋白前S2（Pre-S2）是HBV表面蛋白成分，为HBV侵入肝细胞的主要结构成分，乙肝病毒表面抗原蛋白前S2抗体（抗Pre-S2）是HBV的中和抗体。
1、正常参考值：ELISA法或RIA法Pre-S2阴性；抗Pre-S2阴性。
2、临床意义：Pre-S2阳性提示HBV复制异常活跃，有传染性，抗Pre-S2阳性见于乙肝急性期及恢复早期，提示HBV已被清除，预后良好。
（四）乙肝病毒DNA检测：乙肝病毒DNA（HBV-DNA）成双股环形，是HBV的基因物质，也是乙肝的直接诊断依据。
1、正常参考值：实时荧光定量PCR法阴性。
2、临床意义：HBV-DNA阳性是诊断乙肝的直接证据，表明HBV复制及有传染性。也用于监测应用HBsAg疫苗后垂直传播的阻断效果，若HBV-DNA阳性表明疫苗阻断效果不佳。
（五）乙肝病毒YMDD变异测定：因为病毒变异的缘故，临床通常把病毒株分为野毒株和变异株，YMDD变异株对临床预后和病毒学反应具有重要意义。当病毒发生了YMDD变异后，拉米夫定失去了对病毒的抑制作用，病毒重新出现复制，会伴有HBVDNA水平反跳和肝功能变化，甚至导致病情恶化。故开展YMDD变异的检测很有必要，对及时调整治疗方案、合理用药及提高疗效具有重要意义。乙肝病毒P基因上的一个重要区段可出现特殊的变异，因而引起这个区段所编码的酪氨酸、蛋氨酸和天门氡氨酸的变化，因为这些氨基酸的英文代号分别是Y、M、D、D，所以称之YMDD变异。
1、正常参考值：实时荧光定量PCR、基因芯片分析、焦磷酸测序法和基因克隆与测序方法该位点序列为酪氨酸－蛋氨酸－天门冬氨酸－天门冬氨酸。
2、临床意义：YMDD是HBV反转录酶发挥催化活性所必需的关键结构，目前临床上广泛使用的胞苷类似物拉米夫定等抗HBV药物，作用靶位主要是HBV反转录酶，通过与底物dNTP竞争结合以抑制HBV的反转录和复制，当病毒YMDD中M突变为异亮氨酸（I）或借氨酸（V），就可能引起抗HBV类药物的失效，产生耐药性，YMDD测定结果为临床抗HBV治疗用药提供了实验室诊断依据。
三、丙型肝炎病毒标志物检测：
（一）丙肝病毒RNA检测：丙型肝炎病毒(HCV)是一小的有囊膜的单股正链RNA病毒，属黄病毒科丙型肝炎病毒属。HCV基因组中一长的开放读码框架(ORF)有一个E1区和E2/NS1区编码包膜蛋白。包膜区基因是基因组变异最大的部分，故迄今HCV感染者几乎均检测不到对HCV的中和抗体可能与此有关，也可能是引起HCV易持续感染和疾病慢性化的一个原因。NS2-NS5编码非结构蛋白，其中有的功能还不很清楚。NS3编码螺旋酶和蛋白酶，NS3蛋白抗原性强，产生的抗体具有重要诊断价值。NS5编码依赖RNA的RNA多聚酶，NS5蛋白抗体阳性似乎与病毒活动有关。HCV的实验室检测可用PCR方法检测病毒的RNA，也可检测抗体。
1、正常参考值：ELISA法阴性；RIA法阴性。
2、临床意义：HCV-RNA阳性即可确诊病毒复制和有传染性。在疾病的急性期，抗体通常在丙肝起病和接触病毒后3-6个月后升高。抗体的升高可和转氨酶峰值一致或在其后。
（二））丙肝病毒抗体检测：丙型肝炎抗体是由丙型肝炎病毒（HCV）所引起。机体感染HCV后，在血清中抗体出现较晚。
1、正常参考值：抗IgA阴性，抗-HCIgM阴性，抗-HCIgG阴性。
2、临床意义：抗-HCV-IgA是丙型肝炎诊断、预后和疗效观察的可靠指标。 急性丙型肝炎多为抗-HCIgM型，急性期早期诊断依据，如果长期持续性增高，这种病人转成慢性化的可能很高。慢性HCV多为抗-HCIgG增高，故抗-HCIgG的检测是判定急、慢性丙型肝炎的重要指标。恢复期患者抗HCV多为IgG型，且滴度较低。
四、丁型肝炎病毒标志物检测：
（一）丁肝病毒抗原测定：目前发现的位于基因互补股的开放读码框架5(ORF5)能编码1个含215个氨基酸的多肽，即为丁肝抗原(HDAg)。丁肝抗原是一种核蛋白，具有较好的丁肝抗原特异性，在肝内和血清中均可检出，连同血清中的丁肝抗体均可作为丁型肝炎特异诊断的基础。
1、正常参考值：IFA、RIA法和ELISA法均为阴性。
2、临床意义：丁型肝炎病毒抗原出现较早，但仅持续1～2周，由于检测不及时，往往呈阴性反应。HDVAg与HBsAg同时阳性，表示丁型和乙型肝炎病毒同时感染，患者可迅速发展为慢性或急性重症肝炎。
（二）丁肝病毒抗体检测：丁型肝炎病毒抗体分为抗-HDV IgG和抗-HDV IgM两型。
1、正常参考值：IFA、RIA和ELISA法均为阴性。
2、临床意义：
（1）抗-HDV IgG阳性：只能在HBsAg阳性的血清中测得，是诊断丁型肝炎的可靠指标，即使HDV感染终止后仍可保持多年。
（2）抗-HDV IgM出现较早，一般持续2～20周，可用于丁型肝炎早期诊断。HDV和HBV联合感染时，抗-HDV IgM一过性升高；重叠感染时，抗-HDV IgM持续升高。[1]
（三）丁肝病毒RNA测定：病毒RNA编码HDAg蛋白，通过细胞双链RNA腺苷脱氨酶介导，RNA编辑产生两种HDAg，其中S-HDAg的UAG终止密码变成UGG，普遍认为丁肝病毒感染的相关性肝炎比乙型肝炎病毒单独感染病情更严重，更易慢性化。丁型肝炎病毒复制在细胞核进行，涉及宿主细胞RNA聚合酶II进行的RNA指导RNA合成，它以双滚环机制复制，产生每个互补的寡聚体形式，经过位点特异的自动切割和连接，产生环状基因组和反义基因组单体。丁肝RNA在血清中检测可谓诊断提供证据。
1、正常参考值：RT-PCR法阴性。
2、临床意义：阳性可明确诊断为丁肝，HBV与HDV重叠感染的患者易迅速发展为肝硬化或肝癌。
五、戊型肝炎病毒标记物检测：
（一）戊肝病毒抗体检测：HEV为经肠道传播引起戊型肝炎的病原体，呈球形，表面无囊膜，二十面体立体对称，表面有突起结构，内部核酸为单股RNA，属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg，可刺激机体产生抗体。
1、正常参考值：RIA和ELISA法均为阴性。
2、临床意义：起病初期ORF2抗体和ORF3抗体水平均较高，随病程的延长两者均下降，ORF3抗体尤为明显。联合检测ORF2和ORF3抗体可提高试验的敏感性。血清抗HEV IgM和抗HEV IgG阳性率于起病半个月内分别为71.1%(32/45)和97.8%(44/45)，随病程的延长抗HEV IgM较早阴转。
（二）戊肝RNA检测：为提高戊肝的临床确诊率及研究HEV在血清及粪便中消长规律，常应用HEV RNA RT-PCR试剂对HE病人血清及粪便中HEV进行检测。
1、正常参考值：RT-PCR法阴性。
2、临床意义：病后4 d血清中HEV RNA阳性,最长持续90 d,在40 d时75%仍阳性,50 d时仍有16%阳性.粪便中最短检出时间病后6 d,最长为病后33 d,并发现在病后10～20 d便中HEV RNA检出率最高,传染性最强。
六、庚型肝炎病毒标记物检测：
（一）庚肝病毒抗体检测：
1、正常参考值：RIA和ELISA法阴性。
2、临床意义：抗－HGV阳性表示曾感染过HGV，多见于血制品输入性感染。
（二）庚肝RNA检测：HGVRNA对人类的致病性存在争议，HGV在各型肝炎及高危人群中皆以一定比例存在，特别是在急重型肝炎中有所发现，提示可能与重型肝炎有一定关联，且发现其复制地可能不在肝脏，HGVRNA毒血症虽可持续多年，但并不导致慢性肝损害，表明HGV可能并非嗜肝病毒。
1、正常参考值：RT-PCR法阴性。
2、临床意义：人感染庚型肝炎病毒后约1周左右，血清中可检测到HGV RNA。RT-PCR法可作为庚型肝炎病毒感染的早期诊断。
七、输血传播病毒（TTV）检测：输血传播病毒（TTV）。输血传播病毒感染在人群中普遍存在，呈世界性分布。献血者的本病毒检测阳性者达5.0%～14.7%。多次输血或使用血液制品者，静脉吸毒、血液透析患者、器官移植患者等，均是输血传播病毒感染的高危人群，但目前尚缺输血传播病毒相关性肝炎的证据。TTV变异性大，有不同的基因亚型。TTV是一种新DNA病毒。与原因不明的肝硬化及暴发性肝衰的发病有关。在慢性丙型肝炎及慢性乙型肝炎病人中的发病率较高，有可能成为第八号肝炎病毒。
1、正常参考值：PCR和ELISA法阴性。
2、临床意义：TTVDNA阳性表明有TTV感染，但普通人群中TTV阳性率较高，国内献血员阳性率达11％－15％，多为无症状携带者，目前尚不能全面了解TTV的临床和流行病学特征。
第三节 病毒性肝炎检测