一、血清氨基转移酶及其同工酶检测:
(一)血清氨基转移酶:简称转氨酶,是一组催化氨基酸与α-酮酸之间的氨基转移反应的酶类,用于肝功能检查主要是丙氨酸氨基转移酶(ALT),旧称谷氨酸酮酸转移酶(GPT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷氨酸草酰已酸转移酶(GOT)。正常时ALT主要分布在肝细胞的线粒体内,AST主要分布于心肌细胞内,其次分布在肝脏,血中含量很低,当肝脏受损,大量ALT、AST释放入血,故作为肝损时的生化指标,但ALT反映肝损的灵敏度较AST为高。
1、正常参考值:ALT男9---51U/L,女8---41U/L(各医院的测试方法不同,参考值不完全相同)。AST8-28U/L,或8-40U/L。
2、临床意义:谷丙氨酸氨基转移酶主要存在于肝细胞浆内,细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞被破坏,就可以使血清酶增高一倍。因此,谷丙转氨酶被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
如果丙氨酸氨基转移酶(ALT)血清值超过正常上限2-3倍,并持续两周以上,表明有肝胆疾病存在的可能,但须排除嗜酒、化学药物中毒等对肝脏的损害;接触化学物质如四氯化碳、某些重金属、砒霜等可引起中毒性肝炎)及生理状态下,如过度劳累、剧烈活动(乳酸在体内大量生成、积聚,使机体相对缺氧及低血糖,致使肝细胞膜通透性增加,引起转氨酶升高)月经期时等都可能使转氨酶暂时性升高。
(二)AST同工酶:测血清转氨酶活性常有明显升高。AST有两种受不同基因控制的同工酶分别存在于细胞质(c-AST)和线粒体(m-AST)中,而一般认为ALT不存在同工酶,我国学者证实在人组织和血清中也存在类似AST的两种同工酶,即细胞质ALT(c-ALT)和线粒体ALT(m-ALT)。
AST可存在于多种器官中,按含量多少的顺序为肝、骨骼肌和肾排列,还有少量存在于胰腺、脾、肺及红细胞中,肝中AST大部分(70%)存在于肝细胞内线粒体中。ALT也广泛存在于多种器官中,含量最多的不是心脏,而是肝,顺序为肝、肾、心、骨骼肌等,与AST相比,在各器官中含量都比AST少,肝中ALT绝大多数存在于细胞质中,只有少量在线粒体中。
1、正常参考值:ASTs22.9+4.1U/L,ASTm4.5+2.6U/L。
2、临床意义:轻中度急性肝炎,血清中AST轻度升高,其中ASTs上升为主,ASTm正常;重症肝炎、急性重症肝炎、酒精性肝病时血清中ASTm升高;氟烷性肝炎、Reye综合症、妊娠脂肪肝、肝动脉栓塞术后及心肌梗死时ASTm升高。
二、碱性磷酸酶及其同工酶测定:
(一)碱性磷酸酶ALP:碱性磷酸酶(ALP或AKP)是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA或RNA片段的5-P末端转换成5-OH末端。但它不是单一的酶,而是一组同功酶。目前已发现有AKP1、AKP2、AKP3、AKP4、AKP5与AKP6六种同功酶。其中第1、2、6种均来自肝脏,第3种来自骨细胞,第4种产生于胎盘及癌细胞,而第5种则来自小肠绒毛上皮与成纤维细胞。
1、正常参考值:女性50~135U/L;男性45~125U/L。
2、临床意义:临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断,尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平,可测定同工酶以协助明确其器官来源。
(1)生理性增高:儿童在生理性的骨骼发育期,碱性磷酸酶活力可比正常人高1~2倍。处于生长期的青少年,以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。
(2)病理性升高:
----骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等;
----肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等;
----其他疾病如甲状旁腺机能亢进。
(3)病理性降低:见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。
(二)ALP同工酶:碱性磷酸酶用电泳法可分为六型:ALP1、 ALP2、 ALP3、ALP4、ALP5、ALP6,碱性磷酸酶同工酶测定对诊断肝胆疾病有一定帮助,尤其是肝癌。国际酶学委员会按碱性磷酸酶同工酶在淀粉胶电泳上的迁移率,从阳极至阴极依次命名为ALP1、ALP2、ALP3及ALP4,但一般习惯还是按同工酶的器官来源而命名的,分别称为肝、骨、小肠、胎盘和胆汁等五种同工酶。临床检验中常采用电泳技术将不同来源的碱医学教育网收集整理性磷酸酶进行分离,以确定哪种来源的碱性磷酸酶异常,从而进行相应疾病的诊断。正常人只有ALP2 (来源于肝脏)或ALP2、ALP3 (来源于骨骼)兼有,以ALP2为主。
1、正常参考值:(iso-ALP)成人:血清只出现ALP2及ALP3,ALP2> ALP3;儿童:ALP3> ALP2。
2、临床意义:
(1) ALP1 (来源于肝)阳性:见于肝外阻塞性黄疸,转移性肝癌,肝脓肿,肝充血和胆总管结石等。
(2) ALP2增高:见于肝内胆汁淤滞,急性肝炎,原发性肝癌等。
(3) ALP3增高:
----骨骼疾病,如骨肿瘤和肿瘤骨转移,Paget氏病,佝偻病和骨软化症。
----其他疾病,如肾性营养不良,甲亢等。
(4) ALP4 (来源于胎盘)阳性:妊娠期。
(5) ALP5 (来源于肠)阳性:正常人食用脂肪后以及肝硬化,酒精中毒。
(6) ALP6阳性:溃疡性结肠炎。
三、r-谷氨酰转移酶及同工酶测定:
(一)r-谷氨酰转移酶GGT:r-谷氨酰转移酶(GGT),旧称r-谷氨酰转肽酶(r-GT),参与谷胱甘肽的代谢,肾脏、肝脏和胰腺含量丰富,但血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统,因此当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中GGT增高。
1、正常参考值:硝基苯酚速率法(37℃):男<50U/L;女<32U/L。
2、临床意义:
(1)胆道阻塞性疾病:原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等所致的慢性胆汁淤积;肝癌时由于肝内阻塞,诱使肝细胞产生多量GGT,同时癌细胞也合成GGT,使GGT明显升高,可达参考值上限的10倍以上。
(2)急、慢性病毒性肝炎和肝硬化:急性肝炎时,GGT呈中等度升高;慢性肝炎、肝硬化的非洁动期,酶活性正常,若GGT持续升高,提示病变洁动或病情恶化。
(3)急、慢性酒精性肝炎和药物性肝炎:GGT可呈明显或中度以上升高(300~1000U/L),ALT和AST仅轻度增高,甚至正常。酗酒者当其戒酒后GGT可随之下降。
(4)其他:脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺肿瘤等GGT亦可轻度增高。
如果是病理性的原因造成的,r-谷氨酰转肽酶会成倍升高;若轻度升高,也有可能是饮酒、熬夜、疲劳、服用药物等原因所致。
(二)r-GT同工酶:血清中r-GT同工酶有三种形式,但还缺少理想的方法加以测定,r-GT1(高分子质量形式)存在于正常血清、胆道阻塞及恶性浸润性肝病中。r-GT2(中分子质量形式)由两种成分组成,主要分布于肝脏疾病中,对肝癌的敏感性与特异性均较高,在AFP阴性肝癌中其阳性率达86.4%;若与AFP联合检测可使肝癌诊断正确率达94.4%,另一种成分存在于胆道阻塞性疾病。R-GT3为低分子质量复合物,尚无重要意义。也有人认为r-GT这些不同形式是蛋白质翻译后的变体,而非通常意义上的同工酶。
四、乳酸脱氢酶:(见本篇第八章第六五节)。
五、α-L-岩藻糖苷酶AFU:α-L-岩藻糖苷酶(AFU)是一种溶酶体酸性水解酶,1980年法国学者Deugnier等研究发现,AFU在诊断肝细胞癌中敏感性好,阳性率高,是AFP阳性率的三倍以上,对AFP阴性病例及小细胞肝癌的诊断价值极大,是早期原发性肝癌诊断的有用指标。并被众多研究所证实。81.2%的原发性肝癌患者血清AFU水平增高,与AFP联合检测可提高原发性肝癌诊断阳性率达93.1%。
(一)正常参考值:27.1±12.8U/L。
(二)临床意义:
1、肝组织活检证实为原发性肝癌者,血清AFU的阳性率为AFP阳性率的3倍以上。在肝硬化患者中检测AFU,如其活性增加,对发现一些较小的肿瘤更具有价值,此时AFP不能对较小的肿瘤做出诊断。因此,应用和推广AFU作为原发性肝癌新的诊断指标,具有重要的意义,尤其是AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。因与AFP无明显相关可互初诊断,联合检测可提高肝癌的检出率
2、妊娠与卵巢肿瘤:研究表明,随妊娠周数增加血浆AFU递增,在自然分娩或人工终止妊娠后,迅速下降,5天降到正常。卵巢癌患者血清AFU活性降低,且与疾病分期、肿瘤负荷、组织学分型和肿瘤分化程度无关。良恶性卵巢癌患者血清AFU活性降低可能与遗传因素有关
3、其它:岩藻糖苷酶贮积患者由于先天性组织器官和体液中AFU缺乏或活力降低,导致糖蛋白或糖脂代谢紊乱。胃癌患者血清AFU升高,急性胰腺炎不升高,囊性纤维变性伴发胰腺炎时则下降,进行性锥体营养不良 血清AFU活性下降。
4、动态观察对判断肝癌疗效、预后、复发有重要意义。
5、血清AFP在转移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌也可增高;在肝硬化、慢性肝炎、消化道出血等也有轻度增高。
六、谷氨酸脱氢酶GLDH或GDH:是线粒体酶,主要存在于肝脏、心肌及肾脏,少量存在于脑、骨骼肌及白细胞中。GDH除催化L-谷氨酸脱氢外,还具有催化其他氨基酸如L-缬氨酸、L-2-氨基丁酸及L-亮氨酸脱氨。其测定方法主要是连续监测法。其活性测定是反映肝实质(线粒体)损害的敏感指标,反映肝小叶中央区的坏死。
(一)正常参考值:男性0-8U/L,女性0-7U/L。
(二)临床意义:升高:急性病毒性肝炎、慢性肝炎、肝硬化,但肝癌、阻塞性黄疸GDH活力正常。
七、5'-核苷酸酶5'-NT:5'-NT是一种碱性单磷酸酯酶,能专一水解核苷酸,此酶广泛存在于人体各组织,如肝、胆、肠、脑、心、胰等,定位于细胞质膜上,5'-NT测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。
(一)正常参考值:0~11U/L。
(二)临床意义:血清5'-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病,如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等,其活性变化与ALP一致。但骨骼系统疾病,如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等,通常ALP活性升高,而5'-NT正常。因此ALP和5'-NT同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。
八、单胺氧化酶MAO:单胺氧化酶为催化单胺氧化脱氨反应的酶。也有称为含黄素胺氧化酶,为一种含铜的酶分布在肝肾胰心等器官,肝中MAO来源于线粒体。
(一)正常参考值:0~3U/L。
(二)临床意义:
1、临床上测定血清MAO主要用于诊断肝硬变。肝硬变时,血清MAO活性常明显增高,阳性率可高达80%以上。
2、肝外疾病:慢性充血性心力衰竭、糖尿病、甲亢、系统硬化症等,MAO也可升高。
九、脯氨酰羟化酶PH:脯氨酸羟化酶(PH)是胶原维持三螺旋稳定结构的基础,是胶原合成的关键步骤。PH是一种糖蛋白。肝内PH活性随肝纤维化进展而逐渐升高。该酶活性主要反映肝纤维化的活动情况。用单克隆抗体测定血清免疫反应性PH含量,在慢性活动性肝炎伴有碎屑样坏死、炎症及活动性肝硬化时明显增加,血清PH水平与肝纤维化程度、血清PⅢP水平相关。
(一)正常参考值:39.5±11.87μg/L。
(二)临床意义:升高,肝硬化、慢性肝炎活动期、酒精性肝炎。